根據(jù)波長選擇部分的不同，拉曼光譜技術(shù)可以分為兩個類型：1.基于色散的拉曼光譜系統(tǒng)。2.基于傅里葉變換的拉曼光譜系統(tǒng)（FT-Raman）。
色散型拉曼光譜系統(tǒng)，探測的拉曼信號通過光柵等分光器件進(jìn)行分光，然后使用CCD圖像傳感器（以下簡稱CCD），光電二極管陣列同時探測不同波長的拉曼信號。
傅里葉變換拉曼光譜系統(tǒng)，探測器使用的是光電倍增管（以下簡稱PMT），雪崩光電二極管（APD）等點探測器，得到的原始信號是拉曼信號經(jīng)過邁克爾遜干涉儀的信號，拉曼光譜是通過對干涉信號的傅里葉變換得到的。因為FT-Raman測量光譜時間很長，需要~30分鐘。因而現(xiàn)在主流的拉曼設(shè)備是基于色散的拉曼光譜系統(tǒng)。
一，常見拉曼光譜系統(tǒng)的組成部分
常見的拉曼光譜系統(tǒng)主要分為四個組成部分：激發(fā)光源（激光），樣品激發(fā)與信號收集部分，波長選擇部分和探測器。
1，激發(fā)光源
由于拉曼信號比較微弱，因此為了得到可以探測的拉曼光譜，激發(fā)光源需要使用激光器。在20年前，氬氣和氪氣離子激光器是主要使用的激發(fā)光源。近些年來，隨著半導(dǎo)體激光器技術(shù)的發(fā)展，一些工作波長是近紅外的半導(dǎo)體激光器也成為了主流。根據(jù)激發(fā)波長的不同，激發(fā)光源可以分為三個類型，他們都有自己的優(yōu)缺點。
（1） 紫外光源，波長是244nm，257nm，325nm，364nm
紫外光的光源通常是使用氬離子激光器。在紫外光激發(fā)的條件下，分子可以到電子激發(fā)態(tài)，從而實現(xiàn)共振拉曼激發(fā)，這可以顯著的提高拉曼的信號強(qiáng)度。此外，紫外激發(fā)時（＜270nm），拉曼光譜與熒光光譜在不同的波長范圍，因此紫外拉曼可以消除熒光的影響。紫外激發(fā)可以與蛋白質(zhì)，DNA，RNA等生物樣品產(chǎn)生特定性的拉曼增強(qiáng)，從而可以實現(xiàn)對樣本特定結(jié)構(gòu)的分析，而是用可見光是無法實現(xiàn)的[2]。此外，由于紫外光在半導(dǎo)體的穿透深度一般是幾個納米，因而紫外拉曼可以用來對樣品表面的薄層（常見于新型硅基材料SOI材料)。
但是因為紫外光束看不見，并且紫外激光器相對更大型、更復(fù)雜，也更加昂貴，目前紫外拉曼實驗依然屬于高端技術(shù)，需要高水平專業(yè)技術(shù)人員操作。此外由于紫外光子的能量更高，在紫外激光照射下樣品更易于燒壞或者降解，生物樣本也更容易產(chǎn)生變異。
（2）可見光光源，457nm，488nm，514nm， 532nm，633nm，660nm
可見光激光器通常為二極管激光器，532nm激光器通常為半導(dǎo)體激光器泵浦的固態(tài)激光器（DPSS）激光器。相比于紫外光激發(fā)的拉曼系統(tǒng)，可見光拉曼系統(tǒng)的激發(fā)光源體積小巧，價格便宜。對于鏡片、探測器等也沒有特別要求。對樣本也不容易產(chǎn)生損傷。此外，雖然相比紫外拉曼信號較弱，但是相對于近紅外激發(fā)，由于信號波長較短，所以可見光拉曼信號強(qiáng)度仍然較高。
但是在可見光范圍，生物樣本、有機(jī)樣本會產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光，因此可見光激光器通常用于測試無機(jī)物樣本。對于有機(jī)物與生物樣本，一般使用近紅外激光器激發(fā)。
不同激發(fā)光波長下熒光背景對比，波長越長，熒光背景越小
（3）近紅外光源，785nm，830nm，980nm，1064nm
近紅外激光器通常為二極管激光器，其中1064nm激光器通常為Nd:YAG激光器。相比于基于可見光的拉曼系統(tǒng)，近紅外激光器激發(fā)樣本產(chǎn)生的熒光信號會小很多。此外近紅外激光的穿透深度比可見光大，因此近紅外拉曼系統(tǒng)經(jīng)常用于生物樣本與有機(jī)樣本的研究。
不同類型CCD的量子效率曲線。背照式CCD顯著的提高了量子效率。深度耗盡類CCD提高了近紅外的響應(yīng)
不過因為拉曼信號強(qiáng)度與拉曼散射的波長的四次方成反比，因而使用近紅外激發(fā)時，拉曼信號相比使用可見光與紫外光激發(fā)的時候，會弱很多。此外拉曼信號波長達(dá)到了1000nm，在這個區(qū)間，普通的ccd信噪比較低，因而需要使用特別的CCD，比如深度耗盡類CCD。
2，樣品激發(fā)與信號收集部分
拉曼系統(tǒng)中，激發(fā)光一般是使用光纖傳輸或者是使用物鏡/透鏡匯聚到樣本之上，然后再使用光纖或者透鏡收集產(chǎn)生的拉曼信號，然后傳輸?shù)焦庾V儀中分光被探測器探測。具體不同的樣品激發(fā)與收集構(gòu)型可以參見文章《拉曼光譜系統(tǒng)的分類》。
3，波長選擇部分
色散類拉曼系統(tǒng)，也主要分為兩種類型，一種是使用單色儀+PMT,另外一種是使用多色儀+CCD。然而單色儀+PMT系統(tǒng)需要掃描光柵來探測不同波長的拉曼信號，因而探測一個完整的拉曼光譜需要較長的時間。而隨著半導(dǎo)體技術(shù)的發(fā)展，CCD現(xiàn)在也具有較高的靈敏度和信噪比，因此使用多色儀+CCD成為了主流的拉曼系統(tǒng)類型。
基于多色儀與CCD的探測系統(tǒng)
由于常見的拉曼光譜峰寬度在~20cm-1，因而要求多色光譜儀分辨率至少好于10cm-1。此外拉曼光譜一般分布在500-1800cm-1，這個區(qū)域一般被稱為指紋區(qū)域，因此要求設(shè)計光柵使CCD可以探測這個區(qū)域的信號。
4，探測器
由于拉曼信號十分微弱，因此對于CCD的靈敏度有較高的要求，因而通常使用背照式的CCD提高量子效率。而為了能探測785nm激光激發(fā)的信號，需要探測器在1000nm附近有較好的響應(yīng)，因此需要使用深度耗盡類CCD。此外，為了降低暗噪聲的影響，通常需要對ccd進(jìn)行降溫。
二，拉曼光譜系統(tǒng)信號處理方式
拉曼光譜包括了許多拉曼峰，每個拉曼峰的主要信息包括峰值的位置，寬度，強(qiáng)度。為了能夠從拉曼光譜中獲取更多的信息，需要對拉曼光譜進(jìn)行進(jìn)一步的處理。首先是先對拉曼光譜進(jìn)行去除熒光，光譜儀強(qiáng)度響應(yīng)矯正，波長標(biāo)定等，得到波長，峰值均為準(zhǔn)確的拉曼光譜。
拉曼光譜的三種處理方式
對于拉曼光譜可以進(jìn)行以下三種處理：
1. 直接觀察拉曼光譜峰高度，光譜位置的變化，分別可以得到分子濃度，分子結(jié)構(gòu)的變化。比較適合進(jìn)行定性的分析，比如研究不同疾病的生物組織的組分變化。
2. 首先采集含有足夠大樣本的光譜庫，然后在獲取新的樣本信號時可以進(jìn)行分類算法，判斷出未知樣本屬于光譜庫里的哪個樣本。從而可以實現(xiàn)樣本識別，疾病診斷等等。常見的分類算法包括了PCA-LDA，PLS-DA等。
3. 由于拉曼信號強(qiáng)度與分子的濃度呈正比。因此混合物的拉曼光譜可以認(rèn)為是各個組分的拉曼光譜以其濃度為權(quán)重的疊加。因而使用線性分解，MCR-ALS等算法可以得到混合物中各個組分的濃度，這種方法常用于顯微拉曼系統(tǒng)中。
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